四川羊肚菌菌种生产(chǎn)基地浅谈羊肚菌菌(jun1)种的培(péi)育方法
发布日(rì)期(qī):2019-05-06
本技术公开了一种中药(yào)材的优质高产种植方法。该方法(fǎ)包括以下(xià)步(bù)骤:(1)母种的制作(zuò)及培养,包括①制作母(mǔ)种培养基:将250g土(tǔ)豆、30g琼(qióng)脂、25g葡萄糖和3g维生素B放入(rù)2000ml的水中加(jiā)热,直(zhí)至琼脂完全煮(zhǔ)化(huà)即得母(mǔ)种培养(yǎng)基,②培(péi)育(yù)母种:将试管放入密封的(de)无菌接种箱中,每个试管中接入1cm×1cm的菌丝后(hòu),置于(yú)20℃培(péi)养箱中,直至生长成(chéng)母种(zhǒng);(2)原(yuán)种(zhǒng)的制作及培养,包括①制作原种培养基:取小麦80%、木(mù)销10%和(hé)麦(mài)麸10%,将(jiāng)所述小麦煮熟后捞出,与(yǔ)所(suǒ)述木销和麦麸搅拌均匀,水分控制在60-80%,100℃下保温6小时,②培育原种;(3)栽培中的制作及培养,包括①制(zhì)作栽培种培养基和(hé)②培育栽培种(zhǒng)。本技术中,培育出优良的羊(yáng)肚菌菌种,提高了种(zhǒng)植的存(cún)活率。
具体实施方(fāng)式
一(yī)种羊肚(dù)菌菌种的培育方法,该(gāi)方法(fǎ)包括(kuò)以下步骤:
(1)母种的制作及培养
①制作母种培养基:将(jiāng)250g土(tǔ)豆,30g琼(qióng)脂,25g葡(pú)萄糖和3g维生素B放入2000m1
的(de)水中加热,直至(zhì)琼脂完全煮化即得母种培养基;
②培育母种:取(qǔ)所述母(mǔ)种(zhǒng)培(péi)养基 200ml装入300ml的试管中,用棉花塞(sāi)住管口(kǒu),将所述试管放在125℃的高压灭菌(jun1)锅内灭(miè)菌1. 5h冷却至室温(wēn)后,将(jiāng)所(suǒ)述试管放(fàng)入密封的无菌接种箱中,每个试管(guǎn)中(zhōng)接(jiē)入1cmX 1cm的菌丝后,置(zhì)于(yú)20℃培(péi)养箱中,直至生长成母种。
在步骤(zhòu)(1)中,土豆需要预先放(fàng)入水中煮半小时,之后将其捞山,再与琼脂(zhī)、葡萄(táo)糖、维生素(sù)B一起放(fàng)入水中煮,直至(zhì)琼脂煮(zhǔ)化,将(jiāng)煮(zhǔ)好的培养(yǎng)基放在试管里,等凝固之后,再(zài)用棉花寒(hán)住试管(guǎn)的管口。进行母种的培育(yù)时,在将试管放入(rù)接(jiē)种箱之前,还(hái)需要用(yòng)75%的酒精擦拭试管(guǎn),对(duì)试管的外壁(bì)进行(háng)洒精消毒(dú)。
在(zài)将(jiāng)试管放进无菌接(jiē)种箱内时,还(hái)需要将用于接种(zhǒng)的下其一同放进接种箱的(de),如(rú):托盘(pán)、酒精灯、打火(huǒ)机、器皿、接种钩、镊子等一起放(fàng)入接(jiē)种箱内进行消毒(dú)处理.对(duì)于接种箱内的消毒处理,可(kě)以将装有高锰酸钾和甲醛混合(hé)物的被子放入接种箱内,消毒时保(bǎo)证接(jiē)种箱的密封。
(2)原(yuán)种的制作及(jí)培养
①制作原种培养(yǎng)基:以质量分数计(jì),取小麦80
%、木销10%和(hé)麦(mài)麸10%,将所述(shù)小麦(mài)煮熟(shú)后(hòu)捞出,与所述木销和麦(mài)数搅拌均匀,水分控制在60-80 %
,装入(rù)培养瓶中,瓶(píng)口用棉花塞住,将所述培养瓶放在(zài)火(huǒ)菌锅里火菌(jun1)后(hòu),100℃下保温6小时,取(qǔ)出(chū)冷却后(hòu)即得原种培养(yǎng)基;
②培育原种(zhǒng):将所(suǒ)述培(péi)养瓶和装有母(mǔ)种(zhǒng)的试管放入接种箱(xiāng)中密封半小时后,再(zài)将(jiāng)试管(guǎn)中(zhōng)的毋种(zhǒng)接入到所述原种培养(yǎng)基的(de)培养瓶中(zhōng),保持温度(dù)20℃即(jí)可。
(3)较培(péi)中的制作及(jí)培养
①制作栽培种培(péi)养基:以(yǐ)质量(liàng)分数计,取小(xiǎo)麦75%煮熟后捞(lāo)出,放(fàng)入15%木销、
5%麦麸(fū)和5%泥上搅拌均匀,含(hán)水量60% -80%.装入(rù)聚丙(bǐng)烯(xī)袋中封口,将所述聚(jù)丙烯袋放在(zài)灭(miè)菌锅里灭菌.常压(yā)100℃下保存(cún)4小时,取(qǔ)出(chū)冷却至(zhì)室温:
②培育栽培种(zhǒng):将所述聚丙烯袋和原种培养基的(de)培养瓶置于接(jiē)种箱中密封半小时后,再将步骤(2)培养的原种接入到所(suǒ)述聚(jù)丙烯袋巾,在20℃环境(jìng)下培养(yǎng)15-20天可获(huò)得栽培种(zhǒng)。
在(zài)上述的步骤(1)之前,还需要采集新鲜的羊肚菌子实体,将子实体切成直径
2-3mm的菌块,取经过高压灭(miè)菌的PDA培养纂,将所述(shù)菌块放在PDA培(péi)养基上,将所述PDA培(péi)养基置于20℃的培养(yǎng)箱中,,周后可获得菌(jun1)丝。
在本方案中,接(jiē)种箱始终处于(yú)无菌状态,在(zài)进行培(péi)养(yǎng)基的(de)接种处理(lǐ)时(shí),在接种(zhǒng)箱内放入一杯装有(yǒu)高锰酸钾和甲醉(zuì)的混(hún)合液(yè)体(tǐ),用于对接种箱内的空气进行杀(shā)菌消毒处理。
与(yǔ)现(xiàn)有(yǒu)技术相比.本技术实施例具有(yǒu)以下优点:
通过应用(yòng)本技(jì)术实施例的(de)技(jì)术方案,在羊肚菌(jun1)菌种的培育过程中,通(tōng)过对现有技术中的培(péi)养基配方进行改进,在(zài)菌种培(péi)育的各阶段采(cǎi)用(yòng)不同的培(péi)养基达到最好的培育效果,木方案提供的菌(jun1)种培育方(fāng)法,培(péi)育出的羊肚菌(jun1)菌种品质优良,同(tóng)时,大大(dà)提高了羊肚(dù)菌(jun1)种植的存活(huó)率。